笔杆检测报告单（全文对照）

1.黄瓜(Cucumis sativus L.)是我国设施内主栽果菜之一,但由于长期不良的种植习惯,

1.【摘要】:⁞黄瓜(Cucumis sativus L.)是我国设施主栽蔬菜作物之一。在设施生产中,土壤次生盐渍化已成为设施黄瓜生产的主要障碍之一,土壤次生盐渍化的主要阴离子类型为NO_3~-。研究表明,外源蔗糖在一定程度上可提高植物的抗逆能力,

2.根际土中筛选出3株对黄瓜专化型尖孢镰刀菌具有拮抗作用的菌株,且菌株均具有产IAA和铁载体能力,通过形态观察和分子生物学鉴定,

1.(河北农业大学植物保护学院,河北保定071000)⁞摘要:从河北省、内蒙古自治区及贵州省等地的16个马铃薯试验田采集根际土样,分离得到288株芽孢杆菌菌⁞株。经筛选得到6株对尖孢镰刀菌马铃薯专化型具有较强拮抗作用的菌株NZ-4、NZ-5、NZ-6、HC-Z-18、HC-⁞Y-5和HC-Y-16,其抑菌带宽度均达到6.6mm以上,抑菌圈直径均大于20.0mm。根据它们的菌落和菌体形态特⁞

2.3小结与讨论本研究以 ACC 为唯一氮源采用富集定向筛选方法,从江苏省沿海滩涂植物根际土壤中分离到1株菌株 SC一12,其产 ACC脱氨酶的能力最强,且具有较强的产 IAA 和铁载体能力。通过形态观察、生理生化特征以及16S rDNA 鉴定为同温层芽孢杆菌(Bacillus stratospheri— CUS)。本研究结果表明,菌株 SC一12在硝酸盐胁迫下对辣椒、

3.环境污染和农产品安全以及化学肥料的过度使用造成的土壤肥力下降等行业痛点问题。

1.进而影响到人和动物的生存环境,并且,大气污染是没有国界的,能够通过空气流动影响别的国家,容易引起国际纠纷,威胁世界和平稳定发最后,土壤退化和荒漠化。由于资本主义国家农业过度使用化学肥料,造成的土壤肥力下降,出现了严重的生态赤字现象。马克思曾说:"资本主义农业的任何进步,都不仅是掠夺劳动者的技巧的进步,而且是掠夺土地的技巧的进步,

4.三、国、内外研究现状和发展动态

1.构建再生体系;并在此基础上,分别以无菌苗叶片和愈伤组织为材料,研究原生质体游离条件,建立栓皮栎叶肉和愈伤组织原生质体游离技术体系,为进一步开展栓皮栎细胞工程途径遗传改良奠定基础。(二)国、内外研究现状和发展动态,并附主要参考文献(限1000字)植物原生质体为植物育种基础研究和遗传工程提供了一个方便的遗传操作实验系统。利用原生质体可以进行细胞融合和体细胞杂交,是一种创造远源杂种,

5.土传病原菌是指通过土壤传播并引起植物病害的病原微生物,包括真菌、细菌、病毒和线虫等。土传病原菌的产生和传播原因主要是由于不当的农艺措施、

1.而且影响寄主植物的抗病能力。因此,正确认识病原⁞微生物、寄主植物和环境条件三者之间的关系,无论在理论上和实践上都是重要的。⁞2.植物病原微生物和植物病害能引起植物病害的病原微生物主要包括真菌、细菌和病⁞毒,其中真菌最主要。⁞(l)植物病原真菌和植物真菌病害植物病害中,真菌病害是最重要的一类,约占95%。很多真菌都可以引起植物病害。例如,藻状菌可引起马铃薯和番茄晚疫病;

2.同时达到农业的绿色可持续发展的目的(李琬⁞氮素形态影响Bacillus amylolyquefaciens T-5促生及抵御青枯菌入侵的根际效应研究⁞1.2根际有益菌.土传病原微生物的互作机制⁞土传病原菌是一类通过土壤传播、造成植物毁灭性病害的细菌或真菌病原体⁞(Jiang et a1.,2017;Wei et a1.,2011),这类病原菌从土体土进入根际后,在合适的条⁞件下增殖并入侵到寄主植物体内,

6.2019),土传病害具有较强的隐藏性、较高的传染性,其中,枯萎病是危害较严重的土传病害之,

1.生产造成重大经济损失.在病原菌迅速进化、耐药性增强以及对低投入可持续农业模式需求的背景下,探讨土传病害防控的新策略已刻不容缓,而且管控土传病害对于农业"双减"以及全球粮食安全至关重要[1].土传病害具有较强的隐藏性、较高的传染性,被人们称为"作物癌症".常见的毁灭性土传病害主要有枯萎病、软腐病、纹枯病、青枯病等,这些病害一旦发生会直接导致农作物减产,甚至绝收.目前,对土传病害的防治主要是使用化学农药,

2.edu.cn⁞(华南农业大学农学院,广州510642)⁞摘要:由尖?&镰刀菌古巴专化型(FUSarium oxysporum f. sp. cubense, FOC)侵染引起的香蕉枯萎病是香蕉病害中危害最为严重的土传病害之一,此病的传染性强,对全球香蕉种植业的健康发展造成严重障碍。近年来的研究表明,香蕉枯萎病的发生与土壤中尖狗镰刀菌的数量有关,降低土壤中病原菌数量,抑制病原菌的增长是防治香蕉枯萎病的关键因素。

7.而且还容易造成环境污染,影响土壤和水质,造成农药残留问题,严重影响食品安全(Raman et al.,2017)。

1.小绿叶蝉对药易产生抗性,即使用化学防治,按农药的说明剂量喷杀也难以致死,往往加大剂量和交替使用农药才能控制。目前,贵州防治病虫的主要手段还是化学防治,既损害了茶园生态,也造成了茶叶中农药残留问题,给食品安全和茶叶的国际竞争带来严重影响。据调查,目前各地使用农药混乱,有的茶区年喷药次�9�9571�9�9第7期罗显扬等贵州茶业发展的现状、优势与对策⁞

2.对于食品的需求量非常高,所以在进行农产品种植的过程中,采用喷洒农药的方式来保证农产品的生产产量。但是,在实际喷洒的过程中,最常见的就是农药残留问题,其势必会对食品安全造成严重影响。⁞一、农药残留的危害⁞我国人口不断增长的大环境下,粮食需求量也在不断扩大,农业生产规模也相应扩大。在提高农作物产量的过程中,

3.目前广大农户在西瓜甜瓜生产过程中同样不能有效保证绿色用药。一方面,虽然大多数农户对于使用化学农药所产生的诸如可能导致人体产生慢性毒害、产生农药残留问题、影响果品品质、造成环境污染(土壤、水和大气等)、降低土壤肥力等副作用都有一定不同程度的了解,但是出于为了保证西瓜甜瓜产量、减少除虫(草)劳动力投入等经济效益方面的因素考虑,在实际栽培种植过程中依然会使用用于杀菌、

8.013)。目前,大量研究发现植物根际生防菌株可用于防控黄瓜枯萎病病害,且效果显著(王智荣等,2019;

1.农学学报2022年7期2022-08-19⁞根际微生物防治土传病害的研究进展⁞可以通过利用根际生防微生物提高寄主植物抗病性来实现.目前,有大量研究[8-10]发现,植物根际生防菌株可用于防控土传病害,且效果显著.因此,本文围绕近年来根际生防微生物防治土传病害的应用及其相关机制进行综述,并对未来根际生防微生物的研究方向进行展望,以期为深入探索根际微生物辅助土传病害防控的研究提供参考.1根际微生物根际(

9.黄瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum)引起的一种严重的土传病害。

1.138⁞8.3小结与讨论.139⁞第九章主要结论、创新点与展望.141⁞9.1主要结论.141⁞9.2创新点.142⁞9.3展望.142⁞参考文献.144⁞致谢.160⁞作者简历.161⁞摘要⁞由尖孢镰刀菌黄瓜专化型(Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum,FOC)侵染引起的黄瓜枯萎病,是黄瓜生产上的一种重要毁灭性病害,严重影响黄瓜产量和品质,常引起绝收,造成重大经济损失。目前,生产上主要采用化学药剂进行黄瓜枯萎病防治,但化学杀菌剂的长期、

2.随着设施蔬菜种植规模的不断增大,连作现象严重,由镰刀菌(Fusarium)引起的枯萎病造成死棵是影响蔬菜生产的重要因素。其中,由⁞黄瓜专化型尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f. sp.⁞cucumerinum)引起的黄瓜枯萎病严重损害了黄瓜的产量和品质。目前,防治该病害主要依靠化学防治及简单的农业措施,以化学农药为主导的植物病害防治策略引起了环境污染、抗药性增强及农药残留等严重

3.html http www.wenku1.com/news/A45D3C6FE9F5FA2C.html李杰等:西芹腐根浸提液作用后黄瓜枯萎病菌弱毒菌株的筛选2679黄瓜枯萎病( Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum)是由尖孢镰刀菌黄瓜专化型引起的一种土传病害,病菌生活力极强,以菌丝体、菌核和厚垣孢子在土壤、病残体和种子上越冬,在土壤中可存活5~6年或更长的时间。

10.导致土壤中的病原菌数量逐年增加,病害发生的几率和严重程度随之上升。

1.植物吸收了铵态氮形式的氮素后,会使土壤中的H+含量增加,pH值下降,进而造成土壤酸化。1.2.2土传病原菌大量繁殖连作为根系病原菌提供了赖以生存的寄主和繁殖场所,使土壤中病原菌的数量不断增加,导致土传病害发生的几率上升。研究发现,以根、根茎和鳞茎等地下部分入药的中药材极易发生土传病害,并将最终导致其药用价值下降[22]。土壤有害微生物的不断增加,极易诱发土传病害,在药用植物栽培中,表现较为严重的土传病害有根腐病、

11.长期使用化学农药不仅会导致环境污染和农药残留问题,还会使病原菌产生抗药性,降低防治效果。同时,化学农药对土壤和非目标生物的破坏作用,

1.传病害生物防治的研究一直是一个热点和难点。化学防治目前只对少数土传病害有效,对大多数土传病害防效甚微,且化学农药的使用还会造成农药残留、环境污染,同时化学农药的长期使用会使病原菌产生抗药性而导致防治效果下降甚至防治失败。生物防治具有不易使病原菌产生耐药性、对环境安全、生产工艺较简单等特点,所以日益引起人们的重视。生物防治是利用和调控植物和微生物之问关系,

2.引起植物根部乃至全株的病害,⁞造成重大的经济损失。在防治方面,化学防治目前只对少数⁞土传病害有效。对大多数土传病害防效甚微,且化学农药的⁞使用还会造成农药残留、环境污染:同时化学农药的长期使⁞用。病原菌易对其产生抗药性而导致防治效果下降甚至防治⁞失败。⁞一、土传病害生物防治的途径和方法⁞1.直接利用生防放线菌⁞放线菌广泛存在于土壤和植物根际等环境中.作为土传⁞

3.利用柑橘表面有益生物和人工引入拮抗微生物,筛选出多种酵母菌、芽狗杆菌(BaC荡spp.)、假单胞菌(PSeltdOTngaS spp.)防治柑橘采后病害,取得较好的效果,可解决病原菌对化学农药产生⁞的抗药性和果品农药残留问题。当前研制和开发安全有效微生物农药是国际上研究的热点。,⁞6.8.5.2甜瓜采后病害⁞甜瓜采后病害(PoStharVeSt disease of sweet melon)重要的有软腐病、白斑病、黑斑病等,

4.一种可供选择的方法而广泛应用在分析基因型、染色体绘图和染色体组分析。⁞微生物制品的开发⁞化学肥料和杀虫剂在作物生产和害虫防治上的滥用,导致了环境污染、土壤条件恶化、使害虫产生了抗药性和造成农药残留问题。因此世界范围开始关注在使用更安全的生物肥料和生物杀虫剂在综合的营养管理和害虫管理体系中。⁞生物肥料是一些微生物,它们能固定大气中的氮或使土壤固定的磷溶解并使更多的养分

12.化。由于病原菌可以在土壤中长期存活且具有较强的传播能力,因此防治难度较大。

1.该菌的寄主范围较窄,其中被寄生的挤赠主要有东北大黑鲍金龟、华北大黑总金龟、暗黑鲍金龟、东方五月鲍金龟、铜绿艘金龟等。该菌在土壤II中能长期存活且具有一定的传播能力,近年日益引起研究者的重视。国外对其生物学、制剂生产、及应用做过较系统的研宄,但布氏白僵菌的寄主不如球孢白僵菌广泛,专化性较强、

2.ae)等,其中昆虫病原真菌被最早用作与微生物杀虫,在害虫防治方面具有很重要的意义。白僵菌的使用青海大学硕士学位论文第一章白僵菌属于虫生真菌,具有一定的传播能力,而且在土壤中能长期存活,在害虫防治方面发挥着愈加重要的作用。国外对于白僵菌研究的较早,而我国相对来说起步较晚,研究较少。卵孢白僵菌(Beauveria tenella )可通过增加土壤中的带菌量,

13.有效的防控措施。其中,甲基硫菌灵、腐霉利、菌核净、咪鲜胺、扑海因、丙环唑等对菌核病都有较好的控制效果,

1.多方法制定土传病害的防治策略,确保防效持续高效。2.1化学防治2.1.1施用农药施用农药是土传病害传播初期有效的防治方法之一。甲基硫菌灵、腐霉利、菌核净、咪鲜胺、扑海因、丙环唑等均可有效防治菌核病,亦可喷施其复配药剂,目前可用的有50%腐菌利多菌灵可湿性粉剂、40%菌核净多菌灵可湿性粉剂、36%多菌灵咪鲜胺可湿性粉剂等。软腐病可选用77%氢氧化铜可湿性粉剂1000倍液、

14.但也存在一些明显的缺点。这些缺点包括对环境的影响、对人类健康的潜在危害,以及对生态系统的破坏等。

1.我国稻田土壤和稻米有毒重金属的污染也日趋严重。一些工业发达地区,如长三角和珠三角,土壤重金属的富集和污染更为严重。为了减轻或避免有毒重金属对人类的危害。重金属污染对粮食安全、生态系统以及人类健康具有很大的潜在危害,已成为全球性的重大环境问题。土壤淋滤技术是被广泛使用的一种高效除重金属的方法,该技术的关键是有效的淋滤剂。重金属毒害使水稻植株矮小,

2.随动物粪尿排入环境中⁞(Magnussen et a1.,199l;Sarmah et a1.,2006)。残留于动物粪便中的抗生素日益引起了人们的关注,⁞因为随着动物粪便地施用,其能在环境中扩散,这对生态系统及人类健康存在潜在危害。⁞四环素类、磺胺类及喹诺酮类抗生素具有抗菌活性强、抗菌谱广等特点,且四环素类抗生素具有促生长作用,因此在畜禽养殖业中的使用量大。同时检测动物粪便中这三类抗生素残留非常重要,

3.1.2.3内分泌干扰在害虫防治的应用前景⁞1.2.3.1激素类似物在害虫防治的应用⁞从世界形势来看,化学防治在害虫治理中的作用不可替代,但化学防治存在⁞8⁞一些缺点,尤其对环境的影响尤为明显。因此寻找高效、新型和安全的杀虫剂是⁞当前农药研发的热点。昆虫生长调节剂(InsectRegulators,IGRs)的发现是一个⁞重大突破。1985年赵善欢[64]提出IGRs的范畴包括保幼激素、

15.也可以在撒上生石灰或秸秆(碎稻草或小麦秸秆等)后,对土地进行充分的翻耕,并用覆膜和浇水的方式,

1.还可分解残留农药。2.2农业防治加强田间管理。蔬菜栽培过程中,及时清理植株下部老叶、黄叶,采收结束后彻底清除田间病残体,深翻晒土。土传病害发生较轻的地块,可撒生石灰或秸秆(碎稻草或小麦秸秆等)后充分翻地,覆膜浇水,盖严地膜闷棚7~15d,使土温较长时间处于40以上,以杀死残留在棚室内的病菌;土传病害发生较重的地块,每hm2施氰氨化钙375~600kg

16.从黄瓜根际土壤中筛选出三株菌株对黄瓜枯萎病病原菌具有强烈的拮抗作用(闫敏等,2013)。

1.至第10天显著低于对照。说明施用枯草芽胞杆菌B29可促进黄瓜根际细菌和放线菌的生长而抑制真菌的生长,从而对枯萎病菌起到防治作用。韦巧婕等(2013)从黄瓜根际土壤中分离得到一株芽胞杆菌菌株B,其对黄瓜枯萎病病原菌具有较强拮抗作用。与单纯使用有机肥相比,拮抗菌B与有机肥共同施用对黄瓜枯萎病的防治效果达到80.7%,发病率降低了66.7%,病情指数下降了67%,且能促进黄瓜根际细菌及放线菌数量,

2.采用一种生物防治另外一种生物的方法。芽孢杆菌可以形成耐高温、辐射、高酸碱等逆境的芽孢,因而筛选具备高拮抗活性的芽孢杆菌备受人们的重视。⁞罗文建等[5]在黄瓜根际土壤和根、茎中分离出对黄瓜枯萎病病原菌具有较强拮抗作用的细菌菌株,其对黄瓜枯萎病的盆栽防治效果达到66.03%。郑新艳等[6]用筛选得到的菌株防治马铃薯青枯病,发现拮抗菌株不仅能有效拮抗青枯病病原菌,还能提高被试土壤微生物的群落多样性,

17.3.4生防细菌防治植物病害研究现状

1.资源显得十分的微不足道,因此,充分发掘和研究自然界中对番茄黄萎病⁞具有高效生防作用的菌株,达到高效、环保的生物防治目的,依旧是今后番茄黄萎病生防研⁞究领域的重点之一。⁞1.2.2生防细菌防治植物病害研究现状⁞1.2.2.1生防细菌的概况⁞随着现代农业的飞速发展,人们对生态安全问题愈来愈重视,植物病害的防治研究热点⁞集中于寻找安全、有效的方式,生物防治针对植物病害以其不破坏生态平衡且高效的优点

18.Shen等(2005)从洋葱根际土中筛选到1株广谱拮抗菌普城沙雷氏菌(Serratia plymuthica)A21-4,对多种蔬菜病原微生物具有较强拮抗活性。

1.芽孢杆菌、农杆菌、沙雷氏菌等20多个属的PGPR菌株具有良好的生防潜力,有的已开发为生物防治制剂成功应用于农作物、蔬菜和林业生产8|。Shen等9。2从洋葱(Allium ce— pa)根际土壤中分离到1株生防菌株普城沙雷氏菌(Serratia plymuthica)A21—4,该菌株具有定殖能力强、对病原菌拮抗活性高、促生效果明显的优良特性,且对辣椒疫病、辣椒炭疽病、

19.杏外种皮中分离筛选获得对灰梨孢菌、禾谷镰刀菌、藤仓镰刀菌、新月弯孢菌、串珠镰刀菌、尖孢镰刀菌6种供试植物病原菌均具有抑制作用,抑制率在60%~69%之间。

1.芽孢大小约0.5×1.0μm,经革兰氏染色结果为阳性,初步确定为芽孢杆菌,经分子生物学鉴定后,其为贝莱斯芽孢杆菌。贝莱斯芽孢杆菌YX-3对灰梨孢菌、禾谷镰刀菌、藤仓镰刀菌、新月弯孢菌、串珠镰刀菌、尖孢镰刀菌6种供试植物病原菌均具有抑制作用,抑制率在60%~69%之间,贝莱斯芽孢杆菌YX-3对藤仓镰刀菌的拮抗作用较强,抑菌率为69.19%±0.24%,对新月弯孢菌的拮抗作用较弱,抑菌率为60.47%±0.09%。贝莱斯芽孢杆菌YX-3对多种植物病原物具有广谱拮抗作用,

2.贝莱斯芽孢杆菌 PZ-3对6种植物病原真菌均表现出拮抗作用,其中一组对峙试验如图3-4所示,抑菌率均在50.0%以上。贝莱斯芽孢杆菌 PZ-3对藤仓镰刀菌的拮抗作用较强,抑菌率为69.19±0.24%。对灰梨孢菌、禾谷镰刀菌、新月弯孢菌、串珠镰刀菌及尖孢镰刀菌的抑菌率分别为63.74±0.68%、68.02±0.89%、64.92±0.49%、66.28±0.03%;对新月弯孢菌的拮抗作用较弱,抑菌率为60.47±0.09%。

20.谢物或在土壤中改造一些能被植物吸收和利用的养分,也能防治植物病害并促进植物的生长发育(Ma et al.

1.如生长素、赤霉素等。这类微⁞生物肥料在施用后,可刺激和调控植物的生长。此外,某些芽抱杆菌制刻和抗生⁞菌肥料等对某些植物的病原菌具有结抗作用,能防治植物病害,从而促进植物的⁞生长发育郐士鹏5.(,200)。⁞土壤有机质是土壤肥力的重要指标,施入有机肥后可以大量增加土壤有机质⁞含量(Fan,1987),有机质经微生物分解后形成腐殖酸,截留吸附渗入土壤中的⁞

2.废弃物得到资源化利用,减少污染物排放。因此,本发明不但能够从生产原料和生产过程两方面降低生产成本,同时还能提高盐碱土壤改良性能。本发明提供的微生物肥料能够促进作物对养分的吸收和利用,防治植物病害,减少化肥和农药的使用量,从而显著改善农田环境质量,提高农产品的品质。⁞具体实施方式⁞为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白,

21.结合目前国内外研究进展,芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、

1.土壤和农业生态系统中,残留在生态系统中的农药会通过食物链的富集化,最终进入生物体中,那么对人类的生活以及人类的身体健康具有十分严重的影响。1.2国内外研究进展1.2.1菌株的研究国外报道的菌株有芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas 从农药厂废水处理池的活性污泥中分离得到鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonassp.),并且该菌株能以甲氰菊酯贵阳学院毕业论文从长期使用氯氰菊酯的土壤中分离得

2.其中6个属在所有样品中都能检测到,且发酵初期相对⁞丰度>1%,包括乳杆菌属(Lactobacillus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属⁞(Pseudomonas)、Kroppenstedtia、不动杆菌属(Acinetobacter)及魏斯氏菌属(Weissella)。⁞0⁞20⁞40⁞60⁞80⁞100⁞R⁞el⁞at⁞iv⁞e ⁞ab⁞u⁞n⁞d⁞an⁞ce⁞(⁞%⁞)

22.生防细菌是一类分布广、种类繁多的菌株,其作用机理均为抑制病原微生物对宿主的危害,从而降低病原微生物对宿主的危害(Bloemberg et al.,2001; Hong et al.,2011)。关于生防细菌能够促进植物生长和控制植物病害的机理,

1.⁞产品分别是苏云金芽孢杆菌(281个)、枯草芽孢杆菌(88个)和蜡质芽孢杆菌(45⁞个),占了总数的72%。在微生物农药中,以生防细菌为主,其次是放线菌、真菌和⁞酵母菌[7]。生防细菌不仅能够有效地控制植物病害,促进植物生长,而且对人畜安全、⁞环境相容性好、不易使植物病原菌产生抗性,能够满足消费者对农产品产量、质量和⁞安全性的多重需求[8]。利用生防细菌防治植物病害成为农业可持续发展的必然趋势。

23.一些生防菌通过产生几丁质酶、葡聚糖酶、纤维素酶等降解真菌细胞壁,破坏真菌细胞结构。

1.革兰氏阳性好氧细菌,有较强的淀粉和蛋白质水解能力,并能够产生具有多种生物活性的次生代谢产物,广泛应用于各个领域里。在植物病虫害方面,链霉菌对病原菌有很好的拮抗作用。它能够产生几丁质酶、葡聚糖酶和纤维素酶等胞外水解酶裂解真菌细胞壁,使真菌生长受到阻碍;它的次生代谢产物主要为氨基糖苷类、核苷类、多烯类、大环内酯类、四环素类抗生素对多种病原菌的细胞壁合成、蛋白质和核酸的合成具有抑制作用。

2.革兰氏阴性细菌和革兰氏阳性细菌等都有较高的拮抗活性,这也是该属细菌的命名依据⁞和分类依据之一(Christensen & Cook,1978)。溶杆菌通过分泌一系列高活性的胞外水⁞解酶如蛋白酶、磷酸酶、几丁质酶、葡聚糖酶、纤维素酶等降解植物病原真菌细胞壁、⁞防治作物病害,这也是该属细菌具有广谱拮抗活性的原因之一。产酶溶杆菌(Lysobacter ⁞enzymogenes)作为溶杆菌属的典型代表,也具有分泌多种水解酶的能力,

3.对水稻、玉米、大豆等多种作物具有重要的作用。该类菌株可产生诸多的植⁞物激素,如:SA、JA、IAA、GA、CK 和 ABA 等,以调节植物生长[179,232,233]。并可通过⁞自身生命活动产生的能够降解真菌细胞壁的葡聚糖酶、几丁质酶、纤维素酶和蛋白酶,以⁞及抗菌剂,如肽、挥发性有机化合物等[234-236],通过防治作物病害增加作物的产量。本试⁞验采用的土地类芽孢杆菌 NK3-4菌株,分离于大豆根际,具有广谱抑菌和促生作用[183-185],

24.生防菌能够通过多种机制诱导植物产生抗病性,从而提高植物对病原菌的抵抗能力。

1.8]。另一种与SAR 相似的抗性表型可以被一些非致病性的细菌刺激,称为诱导性系统抗性[9,10]。与SAR 不同,ISR 是由茉莉酸和乙烯信号传导途径介导的[11,12]目前已有很多报道表明,生防菌可以诱导植物产生SAR 或ISR 从而提高植物对病原菌的抗病性。在水稻中,陈志谊等[13]报道了枯草芽孢杆菌Bs-916可以诱导苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)等抗病性有关的酶类活性大幅度提高,从而控制水稻纹枯病和稻曲病的发生[14]。戴秀华[

25.获得抗性(Systemic Acquired Resistance, SAR),这是一种由局部感染引发的全植物范围的防御反应。

1.半)活体型病原菌侵染的防御反应过程,JA/ET则主要调⁞节死体型病原菌的抗性反应(Thomma et al 1998,Govrin and Levine 2000,Glazebrook 2005)。植物系统获得性抗性(Systemic acquired resistance,SAR)⁞是SA介导的植物对病原菌侵染的一种防御反应,该过程的发生伴随着SA含量⁞的增加和病程相关蛋白的表达。另外,引起植物SAR反应的关键是可移动信号的植物中的运输,通过烟草嫁接实验说明水杨酸甲

2.methyltransferase ,但编号32在肽链顺序上与编号6有些不同,可能参与了与编号6不同的生化过程,曾有研究发现,水杨酸在植物体内介导了全株获得性抗性(systemic acquired resistance,SAR)的诱导。SAR是植物的一种防御反应,是当植物遭受胁迫时在原位被诱导的,然后再迅速扩散到全株以保护植物。 min 1012 mAU 7.51012.515 VWD1 Wavelength=254nm (VWD\PI000001.D)

3.salicylic acid carboxyl methyltransferase ,但编号32在肽链顺序上与编号6些不同,可能参与了与编号6不同的生化过程,曾有研究发现,水杨酸在植物体内介导了全株获得性抗性(systemic acquired resistance,SAR)的诱导。 SAR 物的一种防御反应,是当植物遭受胁迫时在原位被诱导的,然后再迅速扩散到全株以保护植物不同条件下水稻根系分泌物的化学指纹分析VWD1 Wavelength=254nm (VWD\PI000001.D) mAU 1512.

26.生防菌还能诱导系统抗性(Induced Systemic Resistance, ISR),这是另一种由生防菌诱导的植物防御反应,

1.系统获得⁞性抗性(systemic acquired resistance,SAR)。在受到病原菌侵染时,SAR —定程⁞度上可以缓解病原菌的侵染;诱导系统抗性(induced systemic resistance,ISR)[56]⁞是植物经生防菌诱导产生的抗病机制,作用于SAR相似。生防菌会触发植物的⁞水杨酸途径、茉莉酸途径等通路,影响植物的生理过程,使植物积累过氧化氢酶⁞(CAT)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、

2.根系长度、花数量、叶面积及种子产量均得到明显增加(贼Pf a1.,2001)。万方数据球毛壳菌ND35菌肥肥效试验及其生防机制的研究1.1.2.4诱导系统抗性诱导系统抗病性(Induced systemic resistance,ISR)是指由植物根际生防菌诱导产生的系统抗病性,利用乙烯和茉莉酸介导的信号传递途径。丛枝菌根真菌接种于黄瓜后,黄瓜根系中p.1,3.葡聚糖酶、苯丙氨酸解氨酶和几丁质酶的活性得到显著提高,

27.提高植物对多种病原菌的抵抗力。前人研究发现,将一株拮抗菌株SQY162接种到盆栽番茄中后的1d内,茉莉酸途径(JA)中的关键基因 p/>72的表达量在24小时内大幅增加,

1.在植物防御反应中起到重要作用,NPRl基因的超表达能够诱导其他植物防御相关基因的表达,从而提高植物抗病能力[2651。而PRl是水杨酸介导防御系统的关键元件.其超量表达能够提高植物对病原菌的抵抗力【2鲫。本课题前期研究发现,伴生分蘖洋葱改变了番茄根系基因的表达,尤其是提高了PR基因表达【lo】。前人也研究发现,间作能够提高植物抗性基因的表达。比如,玉米间作提高大豆病程相关基因的表达【2661;

2.酚类物质等的产生和积累,提升寄主植物防病能力等[65]。房志颖通过对盆栽番茄接种拮抗菌菌株 SQY162⁞研究拮抗菌对植株系统抗病性是否有诱导作用,结果表明,在接种拮抗菌株后24小时,茉莉酸途径(JA)的关键基因 p/>72基因表达量大量上升,一直到第5天,表达量仍维持在一个相对高的水平,经研究表明,JA 途径确是菌株 SQY162通过诱导产生系统抗病性的主要途径。同时,

3.能够**ROS (活性氧簇)积累;4、协助抗病毒药剂放大植物RNA沉默效应,效应值提高数倍;5、影驹促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径以及乙烯(ET)和茉莉酸(JA)信号转导途径中的关键基因的表达量;6、诱导植物气孔导度增加,激发气孔免疫效应;7、协同抗病毒药剂提高对靶标位点的刺激,放大药剂的抗病毒效应。»使用方法及用量1、直接加入到各种抗植物病毒药剂中;或与各种抗病毒药剂充分混合后进行叶喷或浇灌;

28.活性氧作为信号分子能够启动植物的防御基因,提高抗病性。

1.这种细胞伤亡对动、植物整体来说,有弊也有利:其弊,则是加重有机体的伤亡;其利,则是有机体对病原体的超敏反应(HR)中,被感染细胞快速死亡,形成病斑,有利于遏止病原体的扩散与发展。作为信号分子的活性氧还可以诱导植物整体抗逆性的提高,甚至引发交叉抗性(CrOSS-tolerance),即早先的胁迫处理(刺激)起着锻炼作用(acclimation),诱导植株或细胞对该胁迫因子(逆境)或对不同逆境抗性的提高。

29.本研究以黄瓜枯萎病为主要防治对象,从抗病性较强的黄瓜根际土壤中筛选出黄瓜专化型尖孢镰刀菌具有有拮抗作用的细菌,并对其进行鉴定和分类。

1.室内毒力测定显示,许多化学药剂对火龙果溃疡病菌有很好的抑制作用[6],但在生产上还没有行之有效的方法控制火龙果溃疡病发生和蔓延。笔者研究了一株从发病果园及其周围土壤中分离筛选到对火龙果溃疡病菌具有拮抗作用的细菌,对其进行鉴定和发酵培养基成分的优化,以期为开发防治火龙果溃疡病的生防制剂提供依据。1.1火龙果溃疡病菌采用病组织分离法[7],从具有火龙果溃疡病典型症状的组织上分离得到,经致病性测定,

30.抑菌圈法等)筛选出对黄瓜枯萎病具有高效拮抗作用的菌株。通过16S rDNA测序、

1.@彭姗姗$郑州轻工业大学食品与生物工程学院!河南郑州450002⁞@杨旭$郑州轻工业大学食品与生物工程学院!河南郑州450002采用平板对峙法从葡萄果表分离的酵母菌中筛选出1株对黄瓜枯萎病病菌具有较强拮抗作用的酵母菌菌株1-101。通过形态特征、生理生化特征和26S r DNA D1/D2区分析研究菌株1-101的分类地位;从拮抗酵母菌与病原菌共培养、拮抗酵母菌的挥发性物质对病原菌的影响以及拮抗酵母

2.挑选形态各异的⁞菌落纯化,对纯化后的菌株进行平板对峙,与此同时,平板对峙本实验室已保存⁞的对马铃薯黑痣病具有良好抑制作用的菌株,3次重复,筛选对黄瓜枯萎病病原⁞菌具有明显拮抗作用的菌株。复筛:对初筛得到的菌株连续培养10代,再次进⁞行对峙试验,挑选拮抗效果明显的菌株。⁞平板对峙法[55]:在PDA平板(90mm)中央接入直径为8mm的尖孢镰刀菌黄⁞瓜专化型菌饼,

3.产业化提供理论依据。⁞摘要⁞本研究针对枯萎病对四川蔬菜的严重危害情况,从黄瓜栽培种的根围土壤中分离、筛选出大量对枯萎病病原菌有拮抗作用的菌株。通过平板对峙法检测,筛选出对病原菌具有强拮抗作用的菌株,研究了菌株的抗菌谱、生理生化特性、促生性以及最佳发酵条件等生物学特性,确定了其在微生物学上的分类地位,并应用发酵产物进行了田间防治黄瓜枯萎病试验,进一步从菌株的发酵产物中分离、

31.3株生防菌还具有分泌生长素和产铁载体的能力,能够促进作物生长和提高作物产量。

1.水平和全细胞蛋白质水平将所获菌株在81%相似性以上聚为5果有较好的一致性,聚类结果可以相互验证。内生菌生活在植物体内,不仅能为宿主植物提供氮素营养,还能分泌生长素、铁载体和ACC 脱氨酶促进作物生长、提高作物抗性,并对某些病原菌有拮抗作用,有着生物防治功能,是一类应用潜力巨大的微生物资源〔24〕。本研究采用3种不同的培养基尽可能多的分离不同种属内生固氮菌,共获得34株内生固

32.植物病理学、分子生物学、农业工程等多学科的研究力量,

1.用基因操作获得的只是一种人工种质新材料,而不是生产上可以立即应用的新⁞品种。运用基因工程技术进行的抗病育种,解决农业生产上真菌危害的难题,并不是⁞一个单一的技术,而是靠分子生物学、植物病理学、遗传育种等多学科的深入研究和⁞紧密合作,还要我们不懈的努力。我们相信随着对病原真菌致病分子机理和基因表达⁞调控机理研究的深入,果树抗真菌基因工程将在生产上得到广泛的应用。⁞

2.为改良微生物除草剂品种、提高防效、改良寄主专一性提供了可能[15].4.6加强联合协作,积极宣传微生物除草剂的研究是一个新兴的多学科交叉的领域[5],因此必须组织包括杂草学、植物病理学、微生物学、遗传学等多学科的研究力量,开展联合攻关、协作研究.对微生物除草剂的安全性和有效性在使用之前就进行全面的试验及预测,以提高微生物除草剂的防治水平,降低风险系数.

33.5、技术路线、拟解决的问题及预期成果

1. Anim.Physiol.Anim. Nutr.201296(6):1147-1156.(四)技术路线、拟解决的问题及预期成果1、技术路线本研究技术路线见下图。2、拟解决的关键问题确定ZEA和E2诱导断奶仔猪子宫形态学和生长激素受体帆布和表达的调控分子机制。3、

34.黄瓜枯萎病是一种由真菌引起的严重病害,严重影响黄瓜的产量和品质。

1.随着种植业结构的调整,日光温室和大棚面积不断增加,设施环境给蔬菜真菌病害的发生、发展提供了适宜的条件,致使其发生种类、数量及危害程度逐年增加,严重影响蔬菜的产量和品质。黄瓜枯萎病是一种严重危害黄瓜的土传性真菌病害[1],其病原为镰孢菌属的尖孢镰刀菌Fusariumoxysporum,一般发病率为20%50%,严重时可达80%以上。长期以来对其防治主要依赖于化学农药,施用化学农药虽有一定的效果,

2.黄瓜枯萎病是一种真菌性土传病害,严重影响了黄瓜的产量和品质。其病原菌为半知菌亚门镰孢属的尖孢镰刀菌黄瓜专化型(Fusariumoxysporumf.sp.cucumerinum,FOC)。目前,黄瓜枯萎病致病机制的相关研究进展比较缓慢,

35.(2)发表SCI论文或中文核心期刊论文1篇。

1.中国农业科学院研究生院中期考核优秀奖;⁞发表中文核心期刊论文2篇。⁞2017年9月,通过中国农业科学院研究生院硕博连读申请,开始攻读博士学位,专业为果树⁞学。期间共发表中文核心期刊论文3篇,SCI论文1篇,授权专利1项。⁞博士期间发表论文情况:⁞1.陈利娜,张杰,牛娟,李好先,薛辉,刘贝贝,夏小丛,张富红,赵弟广,曹尚银,2017.石榴花发育相关基因 pgAGL11的克隆及功能验证.园艺学报,

2.资金2018年财政科技专项资金2019年财政科技专项资金2020年财政科技专项资金2021年财政科技专项资金备注量和品质的影响研究。预期成果:1.发表中文核心期刊论文1篇,SCI或EI论文1篇。2.申请省级科技成果1项。3.辅助培养研究生1名。技术指标:1.揭示麦后高留茬复种绿肥模式下绿肥生长、秸秆腐解、肥力提升、作物增产规律,绿肥产量提高10%,土壤含水量提高10%,

3.一套SFC(SLC)钝化E.coli 的动力学模型,明确动力学参数κ值以及生物学参数A (2)阐明SFC(SLC)对E.coli细胞形态和超微结构的影响因素和作用机理;(3)发表SCI 论文1篇,中文核心期刊论文2-3篇,培养硕士研究生1-2名,参加国内外相关学术会议1-22.3拟解决的关键问题及其解决方法完成该项目需要解决两个关键问题:(1)SFC(SLC)处理装置。亚临界和超临界状态是完成该项目的前

36.选出对黄瓜专化型尖孢镰刀菌具有拮抗作用的微生物菌株。

1.I号院的中国科学院微生物研宄所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC 10967。⁞[0007]本发明所述的错状芽孢杆菌cereus LK_8)对地黄专化型尖孢镰刀菌具有很强的拮抗作用。⁞[0008]本发明所述的有益拮抗菌具有以下几个优点:⁞(I)本发明所述的拮抗菌一蜡状芽孢杆菌cereus LK-8)是从500株土壤细菌中筛选得到的,可有效抑制地黄专化型尖孢镰刀菌的生长。

37.实现有效防治黄瓜枯萎病、提高黄瓜产量和品质的目标。

1.,其中生物熏蒸配施微生物菌剂处理各项指标值⁞的增加最为明显,与 Govardhan [27]、王丹英[28]、李晶⁞晶[29]、姜永雷[30]等人的研究结果一致。王德江等研究⁞发现,生物熏蒸不仅可以有效防治黄瓜枯萎病,而且⁞可以提高黄瓜的产量和品质[31]。彭柱青等研究表明,⁞微生物菌剂可以增加土壤养分,从而提高蜜柑果实⁞品质和产量[32]。生物熏蒸配施微生物菌剂可以改善⁞土壤团粒结构,

38.接种拮抗菌株Z31、L5、Z4处理的黄瓜全株干重和株高均显著高于对照(图3)(P<0.05)。

1.1.4对黄瓜全株干重的影响⁞从图3.4可以看出,小麦根系分泌物处理后第7d时,D123、D125、龙麦35处理的黄瓜全株干重均显著高于对照(p<0.05):第14d时,D123、D125处理的全株干重均显著高于其他处理和对照(p<0.05),第21d时,D123处理的全株干重显著高于其他处理和对照(p<0.05),并较对照增加52.51%。⁞71421⁞

39.在平板对峙试验中表现出一定抑菌效果的菌株,在黄瓜抗病试验中发挥出一定的对枯萎病的防治效果。其中,

1.抗细菌对苗期黄瓜枯萎病均表现不同程度的防治效果,接种拮抗细菌 II142的病情指数最高,达到26.67。由此说明,在体外抑菌活性测定中表现出一定效果的菌株,在苗期黄瓜抗病试验中发挥一定的对枯萎病的防治效果,强弱程度因菌株不同有所差异,其中对于苗期黄瓜枯萎病的防效,菌株 II155效果最好,达到47.78%,其次是菌株 II190,达到⁞36.51%,而菌株 II142的防效最低,

2.⁞%⁞表3-4拮抗细菌的生理生化特征测定⁞25⁞中表现出一定抑菌效果的菌株,在苗期番茄抗病试验中发挥出一定的对黄萎病的防治效果,⁞强弱程度有一定的变化,因菌株不同而异。其中,对于苗期番茄黄萎病的防效,尤以菌株 L7⁞效果最好,达56%,其次菌株 L6,防效均达到45%以上,

3.因此寻找安全有效的生物防治方法越来越受到关注〔13〕。植物内生真菌的次生代谢产物丰富多样,是很多有价值天然产物的重要来源〔14〕。从扁枝衣中分离获得的6株内生真菌中FF -2和 FF -6在平板对峙试验中表现出对多枝横梗霉、黄瓜萎蔫病菌显著的抑菌效果,其中菌株 FF -6对它们的抑制效果最好,这2株地衣内生真菌可望用于多种病原真菌的生物防治。地衣内生真菌中具有明显抑制常见植物病原真菌活性的种类,是有待开发的微生物资源,

40.Z31的IAA产量为17.99±0.11 mg L-1,菌株Z4的IAA产量为15.09±0.65 mg L-1。此外,菌株Z4、Z31、L5均出现橙黄色的螯合圈,菌株L5的螯合圈直径最大,产铁载体能力最强。

1.细菌产铁载体能力进行测定,菌株 TH4、L4、L6、⁞L7、NEAU-D1等5株拮抗细菌在 CAS 检测培养基上出现橙黄色的螯合圈,根据螯合圈直径⁞的大小衡量菌株产铁载体的能力,菌株 L7的螯合圈直径最大,说明其产铁载体能力最强。⁞产铁载体能力菌株 L7>L6>TH4>L4> NEAU-D1,但彼此间差异不显著。

2.绘制IAA标准溶液的标准曲线(表3、图2)。根据标准曲线计算可得,从番茄根中分离出的3株植物内生菌经发酵培养后均具有较高的IAA产量。其中,菌株mr7的IAA产量为67.79mg L-1、菌株mr31的IAA产量为86.00mg L-1、菌株B21的IAA产量为15.48mg L-1(表4)。表3 IAA标准曲线OD530测定值Table 3 OD530determined value of the standard curve ofIAA序号浓度(mg L-1)

3.综合上述测定结果来看,ABY24的产 IAA 能力是六种菌株中最佳的,而 DY12的产 IAA 能力效果最差(图3-1 a)。六株菌株均具有产铁载体能力,根据产铁载体测定结果显示,其中菌株 ABY24的螯合圈最大,说明该菌株产铁载体能力最强,其次是 ABY16,BY24,BY21,DY40,DY12,其中 DY12螯合圈最小,说明该菌株产铁载体能力最弱(图3-1 b 和附录 A-1)。六株菌株均具有溶磷能力,

41.Z31在pH为5.0~9.0时生长曲线趋近于一致,可以适应的 pH 条件较广。L5在pH为5.0~8.0生长曲线趋近于一致(图5)。

1.0、7.0、8.0时都可以生长,对 pH的要求不严格,NN01最适 pH为7.0,在28 h时 OD600的值达到最高点;NN02最适 pH为6.0,在28 h时,结束对数生长期,进入稳定期;NN05在 pH为5.0、6.0、7.0、8.0时生长曲线趋近于一致,可以适应的 pH条件较广,最适 pH为6.0,在28 h时结束对数生长期,进入稳定期。NN04、NN88在 pH为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0时都可以生长,能适应的pH范围较 NN01、NN02、NN05广,

42.综上,3株拮抗菌能耐受的pH的范围较广,对生存环境的要求不严苛,能够适应较强的盐碱环境,

1.32 h时达到最大生长量,在盐浓度为5%、7.5%、10%、12.5%时生长状况较差;NN88最适盐浓度为1%,在28 h 时生长量⁞最大;NN95最适盐浓度也是1%,在24 h时达到高峰。⁞综上,六株拮抗菌能耐受的 pH和盐浓度的范围较广,对生存环境的要求不严苛,⁞推测在很多生态环境下都能生长,具有后期的研发和利用的一个基础。⁞广西大学硕士学位论文六株拮抗芽胞杆菌对土传病害病原菌的抑制作用及其生物学特

43.9、已具备的条件,尚缺少的条件及解决方法

1.对一些食用菌和药用菌很感兴趣,总想探究一些新的研究项目,提高自己的实验基础技能和专业知识,同时也想得到一个践行严谨的科学态度的精神,探索科学现象。2、已具备的条件,尚缺少的条件及解决方法无八、经费预算开支科目预算经费总额试剂与实验耗材打印费、信息费交通费学校批准经费预算金费(元)10000800010001000主要用途购买化学试剂和制作培养基各种原材料资料文献打印和信息查询采集样

44.术中心和杂粮中心拥有荧光定量 PCR 仪、超速冷冻离心机、酶标仪、电转化仪、激光共聚焦扫描显微镜、荧光倒置显微镜、智能人工气候室、

1.DYCP-24BN,北京六一仪器厂⁞转印仪,DYCP-40C,北京六一仪器厂⁞摇床,TS-1,Thermo Scientific 公司⁞流式细胞仪(Becton-Dickinson)⁞荧光倒置显微镜(Leica)⁞激光共聚焦扫描显微镜,Leica 公司⁞酶标仪,Spectra Max M2,美谷分子公司⁞红外扫描仪,ODYSSEY,Li-cor 公司⁞2.2实验方法⁞2.2.1胸腺原代细胞体外培养系统(PTCS)的建立⁞(1)

2.;凝胶成像系统(美国Nucleo Tech);Nanodrop 2000c分光光度计(Thermo);暗箱式紫外透射仪(ZF-90,上海顾村电光仪器厂);倒置荧光显微镜(Olympus IX70);荧光倒置显微镜和激光共聚焦扫描显微镜(日本OLYMPUS公司);-20°C及-80°C冰箱(中国海尔集团);超低温冰箱(LegaciTM Refregeration System);制冰机(SANYO);电子天平秤(Sartorius);pH计(

3.显微镜等科研仪器。⁞⁞⁞川北医学院⁞四川省高校⁞川北医学院拥有细胞成像和检测系统、晶芯生物芯片研究系统、脑功能嗅觉刺激仪、成像系统、透射电子显微镜、超临界CO2萃取仪、超薄切片机、激光共聚焦扫描显微镜、DNA全自动分析仪、超速冷冻离心机等科研仪器。⁞⁞⁞山东省汽车电子工程技术研究中心⁞山东省科研单位⁞山东省汽车电子工程技术研究中心拥有环境试验设备、高精度贴片机、电性能试验设备、